兔出血癥病毒2型（RHDV-2）核酸檢測試劑盒

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廠商性質：經銷商

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更新時間：2021-06-17

PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。

服務流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟 
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

8.公司產品僅用于科研。

潮霉素B Hygromycin B 31282-04-9 質量規格：>90%,粉末,進分  純化微粒體脂酶D1（Phospholipase D1）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

5'-O-(4,4'-二氧基三基)-N2-異丁?；?2'-脫氧鳥苷(DMT-ibu- dG) iBu-DMT-dG 68892-41-1 質量規格：>98%,BR  真菌/酵母脂酶D1（Phospholipase D1）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

N4-?；?5'-O-(4,4'-二氧基三基)-2'-脫氧胞甘(DMT- Bz- dC） Bz-DMT-dC 67219-55-0 質量規格：>98%,BR  植物脂酶D1（Phospholipase D1）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

N6-?；?5'-O-(4,4'-二氧基基)-2'-脫氧腺苷(DMT-dA-Bz) Bz-DMT-dA 64325-78-6 質量規格：>98%,BR  細菌脂酶D1（Phospholipase D1）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

rU亞酰胺單體 rU Phosphoramidite 118362-03-1 質量規格：>98%,BR  細胞脂酶D1（Phospholipase D1）活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

Bz-rA亞酰胺單體 Bz-rA Phosphoramidite 104992-55-4 質量規格：>98%,BR  組織脂酶D1（Phospholipase D1）活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

i-bu-rG亞酰胺單體 i-bu-rG Phosphoramidite 147201-04-5 質量規格：>98%,BR  純化微粒體脂酶D1（Phospholipase D1）活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

PF299804（EGFR抑制劑） Dacomitinib 1110813-31-4 質量規格：>99%,可用于細胞培養  真菌/酵母脂酶D1（Phospholipase D1）活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

Ac-rC亞酰胺單體 Ac-rC Phosphoramidite 121058-88-6 質量規格：>98%,BR  植物脂酶D1（Phospholipase D1）活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

素(含檸檬酸鹽緩沖液) Tetrodotoxin 4368-28-9 質量規格：>98%,進分  細菌脂酶D1（Phospholipase D1）活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

素純粉 Tetrodotoxin 4368-28-9 質量規格：>98%,進分  細胞脂酶D2（Phospholipase D2）水解活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

AC-DC亞酰胺單體 Ac-dC Phosphoramidite 154110-40-4 質量規格：>97%,BR  細胞脂酶D2（Phospholipase D2）脂轉移活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

2,2'-脫水-5-基尿苷 2,2'-Anhydro-5-Me-U 22423-26-3 質量規格：>97%,BR  組織脂酶D2（Phospholipase D2）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格：20次

7-DEAZA-7-碘-2'-脫氧鳥苷 7-Deaza-7-I-2’-dG 172163-62-1 質量規格：>97%   進口/國產 規格：

兔出血癥病毒2型(RHDV-2)核酸檢測試劑盒Benzoylaconine 苯甲酰原堿 466-24-0  20mg

Sipeimine 西貝母堿 61825-98-7  20mg

羊抗兔IgG-HRP 1ml  支

5ml吸頭盒 28孔  個

Campesterol 菜油甾醇 474-62-4  10mg

Wogonin 漢黃芩素 632-85-9  20mg

Neferine 甲蓮心堿 2292-16-2  20mg

IgG干粉 10mg  支

Eugenol 丁香酚 97-53-0  0.5ml

透析袋MD25(7000D ) 5M  卷

Cis-Anethol 茴香腦 104-46-1  20mg

Tetramethylammonium bromide 四甲溴化銨 25g  瓶

 SERPINA6 基因全長ORF克隆

野豬 Transferrin / TF 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 Apolipoprotein H / APOH ELISA配對抗體

大鼠 CD155 / PVR 基因全長ORF克隆

 DBC1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽

甲型流感 H1N1 (USSR/90/1977) 神經氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽

小鼠 TACSTD2 基因全長ORF克隆

 FMO2 基因全長ORF克隆

 S100PBP 基因全長ORF克隆

 CD44 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 METAP2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

重組 FAM3B 蛋白 (Fc 標簽)