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021-59989018
產品簡介:
產品型號:50T
廠商性質:經銷商
訪問量:250
更新時間:2021-06-09
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
甲型流感病毒核酸檢測試劑盒價格 | 50T | HE60561-R |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
PKA(Human Protein kinase A) ELISA Kit 人蛋白激酶A 96T
ADAM10(Human A Disintegrin And Metalloprotease 10) ELISA Kit 人解整合素樣金屬蛋白酶10 96T
MMP11(Human matrix metalloproteinase 11) ELISA Kit 人基質金屬蛋白酶11 96T
TS(Human thymidylate synthetase) ELISA Kit 人胸苷酸合成酶 96T
TPHuman thymidinephosphorylase) ELISA Kit 人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶 96T
PARP(Human Poly ADP ribose polymerase) ELISA Kit 人多聚ADP核糖聚合酶 96T
GCK(Human glucokinase) ELISA Kit 人葡萄糖激酶 96T
MAO(Human monoamine oxidase) ELISA Kit 人單胺氧化酶 96T
cPLA2(Human cytosolic phospholipase A2) ELISA Kit 人胞漿型磷脂酶A2 96T
DAO(Human diamine oxidase) ELISA Kit 人二胺氧化酶 96T
COX-2(Human cyclooxygenase-2) ELISA Kit 人環加氧酶2 96T
CDK5(Human Cyclin Dependent Kinase 5) ELISA Kit 人周期素依賴性激酶5 96T
KLK 10(Human Kallikrein 10) ELISA Kit 人激肽釋放酶10 96T
PLC Gamma1(Human Phospholipase C Gamma1) ELISA Kit 人磷酯酶Cγ鏈 96T
NA(Human neuraminidase) ELISA Kit 人神經氨酸酶 96T
PIPLC(Human phosphoinositide-specific phospholipase C) ELISA Kit 人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C 96T
PLC(Human Phospholipase C) ELISA Kit 人磷酯酶C 96T
Tyk-2(Human tyrosine kinase2) ELISA Kit 人酪氨酸激酶2 96T
ICE(Human Interleukin 1 Beta converting enzyme) ELISA Kit 人白介素1β轉換酶 96T
ILK-1(Human integrin-linked kinase 1) ELISA Kit 人整合素連接激酶1 96T
CYP21B(Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase) ELISA Kit 人細胞色素P450c21B/21-羥化酶 96T
TdT(Human terminal deoxynucleotidyl transferase) ELISA Kit 人末端脫氧核苷酸轉移酶 96T
IDO(Human indoleamine 2,3-dioxygenase) ELISA Kit 人吲哚胺2,3-雙加氧酶 96T
PRSS(Human serine protease) ELISA Kit 人絲氨酸蛋白酶 96T
Syk(Human spleen tyrosine kinase) ELISA Kit 人脾臟酪氨酸激酶 96T
STK(Human serine/threonine protein kinase) ELISA Kit 人絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶 96T
IRAK(Human interleukin receptor associated kinase) ELISA Kit 人白介素受體相關激酶 96T
UK(Human urokinase) ELISA Kit 人尿激酶 96T
PCK(Human phosphoenolpyruvate carboxykinase) ELISA Kit 人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 96T
Human trypsin ELISA Kit 人胰蛋白酶 96T
BACE1(Human Beta-site APP-Cleaving Enzyme 1) ELISA kit 人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1 96T
PDI(Human Protein disulfide-isomerase precursor) ELISA Kit 人蛋白二硫化物異構酶前體 96T
anti-GDF-8 肌細胞生長抑制素抗體 0.2ml
Anti-GDNF 膠質細胞源性神經營養因子抗體 0.1ml
Anti-Gelsolin 凝溶膠蛋白抗體 0.2ml
Anti-GFAP 膠質纖維酸性蛋白抗體 0.1ml
Anti-GFP 綠色熒光蛋白 0.2ml
Anti-GFRA4 GDNF家族受體α-4抗體 0.2ml
Anti-GFRα-1/GDNF GDNF家族受體α-1抗體 0.1ml
Anti-GHR 生長激素受體抗體 0.1ml
Anti-Ghrelin 腦腸肽抗體 0.1ml
Anti-GHRF/GHRH 生長激素釋放激素因抗體 0.1ml
Anti-GIP 胃泌素抑制肽抗體 0.2ml
Anti-GITR 糖皮質激素誘導腫瘤壞死因子受體抗體 0.1ml
Anti-Glasses Snake poison Protein 抗眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體 0.2ml
Anti-GLI1 下游轉錄因子Gli1蛋白抗體 0.2ml
Anti-GLP-1 胰高血糖素樣肽-1抗體 0.1ml
Anti-GLP-2 胰高血糖素樣肽-2抗體 0.2ml
Anti-GLUT1 葡萄糖轉運蛋白1抗體 0.1ml
Anti-GLUT2 葡萄糖轉運蛋白2抗體 0.1ml
Anti-GLUT3 葡萄糖轉運蛋白3抗體 0.2ml
Anti-GLUT4 葡萄糖轉運蛋白4抗體 0.1ml
Anti-Glycoprotein [Rubella virus] 風疹病毒糖蛋白抗體 0.2ml
Anti-GPA33 結腸癌抗原糖蛋白A33抗體 0.2ml
Anti-GPC3 磷脂?;嫉鞍拙厶?3抗體 0.1ml
甲型流感病毒核酸檢測試劑盒價格Anti-GR 糖皮質激素受體抗體 0.1ml
Anti-GRK1 G蛋白偶合受體激酶1抗體 0.2ml
Anti-GRK2 G蛋白偶合受體激酶2抗體 0.2ml
Anti-GRM2 代謝型谷氨酸受體2 0.2ml
Anti-GRM3 代謝型谷氨酸受體3 0.2ml
Anti-GRM5 代謝型谷氨酸受體5 0.2ml
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。