服務熱線
021-59989018
產品簡介:
產品型號:50T
廠商性質:經銷商
訪問量:404
更新時間:2021-06-11
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
嗜肺軍團菌核酸檢測試劑盒廠家 | 50T | HE60666-R |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
8.公司產品僅用于科研。
大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷(標準品) Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside 113443-70-2 質量規格:HPLC≥98%,標準品 羥脯氨酸(HYP)終點比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:50次
大薊苷 Pectolinarin 28978-02-1 質量規格:HPLC≥98%,標準品 細胞脯氨酸肽酶(prolidase;PLD)紫外比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
大麥芽堿(標準品) Hordenine 539-15-1 質量規格:HPLC≥95%,標準品 組織脯氨酸肽酶(prolidase;PLD)紫外比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
丹參素(標準品) Danshensu 22681-72-7 質量規格:HPLC≥98%,標準品 體液脯氨酸肽酶(prolidase;PLD)紫外比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
丹參素 Danshensu 76822-21-4 質量規格:HPLC>95%,丹參提取 細菌脯氨酸肽酶(prolidase;PLD)紫外比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
丹參素鈉(標準品) Sodium Danshensu 67920-52-9 質量規格:HPLC≥98%,標準品 細胞脯氨酸肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
丹參酮I(標準品) Tanshinone I 568-73-0 質量規格:HPLC≥98%,標準品 組織脯氨酸肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
丹參酮I Tanshinone I 568-73-0 質量規格:HPLC≥95%,BR 血液脯氨酸肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
丹參酮IIA(標準品) Tanshinone IIA 568-72-9 質量規格:HPLC≥98%,標準品 體液脯氨酸肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
丹參酮IIA Tanshinone IIA 568-72-9 質量規格:>98%,BR 細菌脯氨酸肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
丹參酮IIA-磺酸鈉(標準品) Tanshinone IIA-sulfonic sodium 69659-80-9 質量規格:UV≥98%,HPLC≥95% 細胞脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
丹酚酸A(標準品) Salvianolic acid A 96574-01-5 質量規格:HPLC≥98%,標準品 組織脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
丹酚酸B(標準品) Salvianolic acid B 115939-25-8 質量規格:HPLC≥98%,標準品 血液脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
丹酚酸C(標準品) Salvianolic acid C 115841-09-3 質量規格:HPLC≥98%,標準品 體液脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
嗜肺軍團菌核酸檢測試劑盒廠家抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 白介素15(IL15)重組蛋白Recombinant Interleukin 15 (IL15)
纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 白介素16(IL16)重組蛋白Recombinant Interleukin 16 (IL16)
小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 白介素17(IL17)重組蛋白Recombinant Interleukin 17 (IL17)
小鼠組織因子(TF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 白介素18(IL18)重組蛋白Recombinant Interleukin 18 (IL18)
大鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 白介素19(IL19)重組蛋白Recombinant Interleukin 19 (IL19)
牛皮質醇(Cortisol)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 白介素1α(IL1α)重組蛋白Recombinant Interleukin 1 Alpha (IL1a)
甘膽酸(CG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 白介素1β(IL1β)重組蛋白Recombinant Interleukin 1 Beta (IL1b)
酸脫氫酶(LDH) ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 白介素1δ(FIL1δ)重組蛋白Recombinant Interleukin 1 Delta (FIL1d)
兔子α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 白介素1家族成員9(IL1F9)重組蛋白Recombinant Interleukin 1 Family, Member 9 (IL1F9)
兒茶酚胺(CA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 白介素1受體拮抗劑(IL1RA)重組蛋白Recombinant Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA)
牛酸(Lactate)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 白介素1受體Ⅱ(IL1R2)重組蛋白Recombinant Interleukin 1 Receptor Type II (IL1R2)